広州ペプチド研究センターは、ESI-TOF 質量分析法 (その材料が実際にラベルに記載されている化合物であるかどうかを確認する方法) によって、各研究ペプチド バッチの分子同一性を確認します。同一性は、純度や含有量とは異なる質問です。質量分析法は「これは正しい分子ですか?」という質問に答えますが、HPLC 純度およびアッセイは「どのくらいきれいか」および「バイアル内の量はどれくらいか」に答えます。すべての材料は研究および実験室での使用のみを目的として提供されます。

質量分析で実際に確認できること

質量分析計は、イオン化した分子の質量電荷比を測定します。ペプチドの場合、観察された質量は、その配列から計算された理論的分子量と一致する必要があります。一致する場合、結果は、バッチには、異なる配列、切断されたフラグメント、または無関係な化合物ではなく、目的のペプチドが含まれているという結論を裏付けます。

これは アイデンティティ チェックしてください。これは純度のパーセンテージや含有量 (分析) の数値ではありません。バッチはクリーンな同定結果を返すことができますが、購入を決定する前に別個の HPLC 純度レポートと、必要に応じて含有量または対イオンのアッセイが必要です。完全なドキュメント パッケージをレビューする購入者は、これらの層がどのように組み合わされているかを確認できます。 COA、HPLC、LC-MS ドキュメントのレビュー ガイド.

MS ID 結果の読み取り方法

エレクトロスプレーイオン化 (ESI) では、通常、ペプチドは複数の電荷を受け取ります。より大きなペプチドは、一度に複数の質量対電荷値（たとえば、二重、三重、または四価の荷電形態）で出現し、各電荷状態は同じ基礎となる分子量に変換して戻すことができます。より小さなペプチドは主に一価のイオンとして現れる場合があります。したがって、MS ID 結果を読み取ることは次のことを意味します。

  • 各主要ピークの充電状態を特定します。
  • 観察された質量電荷値を中性分子量に変換します。
  • そのデコンボリューションされた重みを配列の理論的分子量と比較します。

銅トリペプチド-1 などの金属錯体ペプチドの場合、スペクトルには金属に由来する特徴的な同位体サインも含まれており、これは遊離ペプチド単独ではなく錯体が存在することを示す有用な追加の確認となります。銅ペプチドの同一性、純度、含有量の区別については、次のとおりです。 GHK-Cuの銅含有量と純度の関係.

うまくいった例

この計算は、購入者が確認できるレポートと購入者が信頼しなければならないレポートを区別するものであるため、一度見る価値があります。分子量 639.79 の SS-31 のバッチを用意します。そのスペクトルは 640.72 にピークを示し、320.93 に別のピークを示しました。 1 つ目は陽子を 1 つ持つ分子なので、その陽子を引くと 639.71 が返されます。 2 つ目は質量電荷軸を横切って 2 つの陽子を運ぶため、2 を掛けて 2 つの陽子を引くと 639.85 が返されます。独立して測定された 2 つのピークが同じ重量に収束します。

より小さいペプチドは再び異なる動作をします。分子量 342.43 の KPV のバッチは、343.37、685.90、および 707.87 にピークを示しました。プロトン化された分子、共有プロトンによって結合された 2 つの分子、およびその同じペアが代わりにナトリウム イオンを保持しています。 3 つの異なるイオン形式はすべて 1 つの分子量に一致します。これが、複数のラベル付きピークを含むスペクトルが不純なサンプルの兆候ではない理由です。多くの場合、その逆です。3 つの別々の質量値での偶然の一致は、1 つの質量値での偶然の一致よりもはるかに低いためです。

2 番目の方法で同一性を確認: 参照標準の共溶出

質量分析は、バッチが目的の化合物であるかどうかを確認する唯一の方法ではなく、それ自体では必ずしも十分であるとは限りません。 2 つの異なる分子は分子量を共有できます。 2 番目の独立したチェックでは、同じクロマトグラフィー条件下で購入した同じ化合物の参照標準に対してバッチを実行し、保持時間を比較します。 2 つが実質的に同じ点で同等のピーク形状で溶出する場合、バッチはクロマトグラフィー的に参照物質と同様に動作します。

最近のレタトルチド バッチでは、参照標準の 13.740 分に対して、サンプルは 13.667 分で溶出しました。単独で考えると、決定的というよりは示唆的ですが、共溶出は構造の証拠ではなく、一貫性の証拠です。質量分析の結果と併せて考えると、この 2 つの方法は、分子がカラム上でどのように分配されるか、その重さなど、異なる物理的特性を調べるため、どちらよりも実質的に強力です。参照標準は安価ではありません。これが、商品ペプチドの文書では参照標準が珍しい理由の 1 つであり、参照標準を購入したサプライヤーに問い合わせる価値がある理由の 1 つです。

数値だけでなくレポートを読む

純粋性やアイデンティティの数値は、それを保持する文書と同じくらい重要であり、文書は、誰が見てもわかるような形で内部的に矛盾している可能性があります。 3 つのチェックにより、レビュー担当者のコストはほとんどかからず、問題のほとんどが検出されます。

  • 記載された日付はデータと一致しますか? クロマトグラフィーおよび MS ソフトウェアは、生データのファイル名を印刷物 (通常はチャートの隅) にスタンプし、その名前はほとんどの場合、取得日をエンコードします。ヘッダーにある日付が示され、埋め込まれたファイル名が別の日付を暗示している場合、ドキュメントは生成されたのではなく組み立てられており、図は完全に異なるロットに属している可能性があります。
  • バッチ番号はありますか? それはすべてのページに表示されますか? 識別可能なロットに関連付けられていない純度数値は、箱内の材料と一致することはできません。これは、ペプチドの文書における最も一般的なギャップです。
  • 計器は表と一致していますか? 質量分析ソフトウェアは、独自に計算した分子量をスペクトルとともに出力します。その計算値が要約表に入力された分子量と一致しない場合は、2 つのうちの 1 つが間違っているため、どちらかに依存する前にどちらかを尋ねる価値があります。

関連する点は純度にも当てはまります。クロマトグラムには通常、まったくサンプルではないピーク、つまり分析開始時の溶媒フロントと、終了時にグラジエントが開始条件に戻る乱れが含まれます。それらを計算から除外することは正しく、日常的なことですが、実証可能である必要があります。サンプルクロマトグラムと一緒にブランク溶媒の注入を要求すると、レビュー担当者は除外されたピークがブランクにも表示されることを確認できるため、判断の判断がチェック可能なものになります。

これらはいずれも化学の知識を必要としません。文書を文書として読む必要があります。

バッチごとの本人確認

広州ペプチド研究センターは、ロット間で再利用される単一の履歴結果に依存するのではなく、研究ペプチドバッチに対して ESI-TOF 同一性確認を実行しています。下流の研究所が最初に信頼する必要があるのは ID であるため、バッチごとに ID を確認することで、購入者が実際に受け取る材料と記録を一致させておくことができます。

購入者は、ドキュメント パッケージの一部として特定のバッチに関連付けられた ID レコードをリクエストできます。許可があれば、独立した第三者検証を手配することもできます。サプライヤーによる身元確認と外部研究所による検証は、同じ質問に 2 つの側面から回答するものであり、組み合わせると最も役立ちます。

レビュー全体のどこにアイデンティティが含まれるか

本人確認は入り口であり、全体像ではありません。研究ペプチドの完全なレビューは通常、以下と組み合わせて行われます。

  • 同じバッチの HPLC 純度。
  • 購入者の作業が依存する内容または分析の数値。
  • バッチ番号、製造日と再テスト日、保管と梱包の詳細。
  • SDSと仕様書。

単一の混合された「99%」の主張ではなく、アイデンティティ、純度、内容を個別のバッチリンクされたデータポイントとして維持することで、購買チームは価格だけでなく文書上の見積もりを比較できるようになります。

研究ペプチドはこのようにして確認されました

ESI-TOF MS による同一性確認は、次のようなプロジェクトを含む、広州ペプチド研究センターの研究用ペプチド原料全体に適用されます。 レタルトルチド, セマグルチド, BPC-157, MOTS-c, SS-31, KPV, 銅トリペプチド-1 (GHK-Cu)、DSIP、Kisspeptin-10、Selank などの短い研究用ペプチド。すべては研究および実験室での使用のみを目的とした原材料として提供されます。バッチ ドキュメント パッケージまたは見積もりをリクエストするには、 ドキュメントとRFQリクエストフォーム、またはレビューしてください ドキュメントセンター.

よくある質問

質量分析ではペプチドについて何が確認されますか?

これにより、同一性、つまり測定された分子量が目的の配列の理論上の分子量と一致するかどうかが確認されます。これは、材料が適切な分子であることを示しますが、それ自体では純度やバイアル内のペプチドの量を報告しません。

MS アイデンティティの結果は純度と同じですか?

いいえ。同一性 (質量分析) と純度 (通常は HPLC) は、異なる質問に答える異なる測定値です。バッチは両方ともレビューされ、同じバッチ番号に関連付けられている必要があります。

1 つのペプチドに複数のピークがあるのはなぜですか?

エレクトロスプレーイオン化では、ペプチドは複数の電荷を運ぶことが多いため、一度に複数の質量電荷値が現れます。それぞれの電荷状態は同じ分子量に変換され、これにより同一性が確認されます。

私の特定のバッチの MS ID レコードを取得できますか?

はい。 ID レコードは、バッチ ドキュメント パッケージの一部として提供できます。認可された場合には、独立した第三者検証を手配することもできます。

小さなペプチドがその分子量の 2 倍のピークを示すのはなぜですか?

小さなペプチドは通常、イオン源内でイオンペアを形成するため、スペクトルにはプロトンを共有する 2 つの分子、または単一プロトン化された分子と並んでナトリウムイオンを運ぶそのペアが表示される場合があります。これらは不純物ではなく同じ化合物のイオン形態であり、それぞれ同じ分子量に戻ります。

分析レポートが購入しているバッチに関連付けられているかどうかを確認するにはどうすればよいですか?

レポート自体に表示されるバッチ番号を探し、記載された取得日がチャートに印刷された生データのファイル名と一致していることを確認してください。バッチ識別子のないレポートは、その数値がどのようなものであっても、納品された資料と照合することはできません。

サプライヤーの身元確認はサードパーティのテストに代わるものですか?

それらは互いに補完し合います。サプライヤー側の身元確認と独立した検証は、同じ質問に 2 つの方向から答えます。真剣な購入者は通常、両方を持つことを重視します。

ID は、証明書に対する 4 つの個別のチェックのうちの 1 つです。純度、含有量、充填量は他のものであり、他のものに代わるものはありません。の 注釈付き証明書のウォークスルー 実際の文書上でそれらを分離し、 出荷前書類チェックリスト それぞれがあなたの手にあるべきときをカバーします。