광저우 펩타이드 연구 센터는 ESI-TOF 질량 분석법을 통해 각 연구 펩타이드 배치의 분자 동일성을 확인합니다. 이 방법은 해당 물질이 실제로 라벨에 표시된 화합물인지 확인하는 방법입니다. 동일성은 순도나 함량과는 다른 질문입니다. 질량 분석법은 "이것이 올바른 분자입니까?"라고 답하는 반면, HPLC 순도 및 분석법은 "얼마나 깨끗한지" 및 "바이알에 얼마나 들어있는지"에 답합니다. 모든 자료는 연구 및 실험실 용도로만 제공됩니다.
질량 분석기가 실제로 확인하는 것
질량 분석기는 이온화된 분자의 질량 대 전하 비율을 측정합니다. 펩타이드의 경우 관찰된 질량은 해당 서열에서 계산된 이론적 분자량과 일치해야 합니다. 그렇다면 결과는 해당 배치에 다른 서열, 잘린 단편 또는 관련되지 않은 화합물이 아닌 의도한 펩타이드가 포함되어 있다는 결론을 뒷받침합니다.
이것은 정체성 확인하세요. 순도 백분율도 아니고 함량(분석) 수치도 아닙니다. 배치는 깨끗한 식별 결과를 반환할 수 있지만 구매 결정 전에 별도의 HPLC 순도 보고서와 해당되는 경우 함량 또는 반대 이온 분석이 여전히 필요할 수 있습니다. 전체 문서 패키지를 검토하는 구매자는 이러한 레이어가 어떻게 서로 어울리는지 확인할 수 있습니다. COA, HPLC 및 LC-MS 문서 검토 가이드.
MS 신원 결과를 읽는 방법
전기분무 이온화(ESI) 하에서 펩타이드는 일반적으로 하나 이상의 전하를 흡수합니다. 더 큰 펩타이드는 한 번에 여러 질량-전하 값으로 나타나며(예: 2배, 3배 또는 4배 전하 형태) 각 전하 상태는 동일한 기본 분자량으로 다시 변환될 수 있습니다. 더 작은 펩타이드는 주로 단일 전하를 띤 이온으로 나타날 수 있습니다. 따라서 MS 신원 결과를 읽는다는 것은 다음을 의미합니다.
- 각 주요 피크의 충전 상태를 식별합니다.
- 관찰된 질량 대 전하 값을 다시 중성 분자량으로 변환합니다.
- 해당 시퀀스의 이론적 분자량과 디콘볼루션된 중량을 비교합니다.
Copper Tripeptide-1과 같은 금속 복합체 펩타이드의 경우 스펙트럼은 또한 금속의 특징적인 동위원소 특징을 전달하며, 이는 유리 펩타이드만 존재하는 것이 아니라 복합체가 존재한다는 유용한 추가 확인입니다. 구리 펩타이드의 동일성, 순도 및 함량 간의 차이는 다음에서 다룹니다. GHK-Cu 구리 함량 대 순도.
실제 사례
산술은 구매자가 확인할 수 있는 보고서와 구매자가 신뢰해야 하는 보고서를 구분하는 요소이기 때문에 한 번 볼만한 가치가 있습니다. 분자량이 639.79인 SS-31 배치를 선택합니다. 스펙트럼은 640.72에서 최고점을 보였고 320.93에서 또 다른 최고점을 보였습니다. 첫 번째는 하나의 양성자를 운반하는 분자이므로 해당 양성자를 빼면 639.71이 반환됩니다. 두 번째는 질량-전하 축을 통해 2개의 양성자를 전달하므로 2를 곱하고 2개의 양성자를 빼면 639.85가 반환됩니다. 독립적으로 측정된 두 개의 피크가 동일한 가중치로 수렴됩니다.
더 작은 펩타이드는 다시 다르게 행동합니다. 분자량이 342.43인 KPV 배치는 343.37, 685.90 및 707.87에서 피크를 나타냈습니다. 즉, 양성자화된 분자, 공유 양성자에 의해 결합된 두 분자, 대신 나트륨 이온을 운반하는 동일한 쌍입니다. 세 가지 다른 이온 형태는 모두 하나의 분자량과 일치합니다. 이것이 여러 개의 라벨이 붙은 피크가 있는 스펙트럼이 불순한 샘플의 표시가 아닌 이유입니다. 세 가지 별도의 질량 값에서 우연한 일치가 하나의 우연한 일치보다 훨씬 적기 때문에 반대인 경우가 많습니다.
두 번째 방법으로 동일성 확인: 참조 표준 동시 용리
질량 분석법은 배치가 의도한 화합물인지 여부를 확인하는 유일한 방법이 아니며 그 자체만으로는 항상 충분하지 않습니다. 두 개의 서로 다른 분자가 분자량을 공유할 수 있습니다. 두 번째, 독립적인 확인은 동일한 크로마토그래피 조건 하에서 동일한 화합물의 구입한 참조 표준에 대해 배치를 실행하고 머무름 시간을 비교하는 것입니다. 두 물질이 비슷한 피크 모양으로 사실상 동일한 지점에서 용출되면 배치는 크로마토그래피 방식으로 기준 물질과 유사하게 나타납니다.
최근 Retatrutide 배치에서 샘플은 13.740분의 참조 표준에 비해 13.667분에 용출되었습니다. 단독으로 생각해 보면 결론적이라기보다는 암시적입니다. 공동 용출은 구조 증명이 아니라 일관성의 증거입니다. 질량 분석 결과와 함께 사용하면 두 가지 방법이 서로 다른 물리적 특성, 즉 분자가 기둥에서 분할되는 방식과 무게를 조사하기 때문에 둘 중 하나보다 실질적으로 더 강력합니다. 참조 표준은 저렴하지 않습니다. 이는 상용 펩타이드 문서에서 흔하지 않은 이유 중 하나이며, 참조 표준을 구입한 공급업체가 일반적으로 이에 대해 문의할 가치가 있는 이유 중 하나입니다.
숫자만 읽지 말고 보고서를 읽어보세요
순수함이나 정체성의 모습은 그것을 담고 있는 문서만큼만 훌륭하며, 문서는 보는 사람이 볼 수 있는 방식으로 내부적으로 일관성이 없을 수 있습니다. 세 가지 검사를 통해 검토자는 비용이 거의 들지 않으며 대부분의 문제를 파악합니다.
- 명시된 날짜가 데이터와 일치합니까? 크로마토그래피 및 MS 소프트웨어는 일반적으로 차트 모서리에 있는 인쇄물에 원시 데이터 파일 이름을 표시하며, 해당 이름은 거의 항상 획득 날짜를 인코딩합니다. 헤더에 날짜가 나와 있고 포함된 파일 이름이 다른 날짜를 암시하는 경우 문서가 생성된 것이 아니라 조립된 것이며 그림은 완전히 다른 로트에 속할 수 있습니다.
- 배치 번호가 있고 모든 페이지에 표시됩니까? 식별 가능한 로트에 연결되지 않은 순도 수치는 상자의 재료와 일치할 수 없습니다. 이는 펩타이드 문서화에서 가장 일반적인 공백입니다.
- 기기가 표와 일치합니까? 질량 분석 소프트웨어는 스펙트럼과 함께 자체 계산된 분자량을 인쇄합니다. 계산된 값이 요약표에 입력된 분자량과 일치하지 않으면 둘 중 하나가 잘못된 것이므로 둘 중 하나에 의존하기 전에 어느 쪽인지 물어볼 가치가 있습니다.
관련 사항은 순도에 적용됩니다. 크로마토그램에는 일반적으로 전혀 샘플링되지 않은 피크(실행 시작 시 용매 전면 및 종료 시 기울기가 시작 조건으로 돌아가는 교란)가 포함됩니다. 계산에서 이를 제외하는 것은 정확하고 일상적이지만 입증 가능해야 합니다. 샘플 크로마토그램과 함께 블랭크 용매 주입을 요청하면 검토자가 제외된 피크가 블랭크에도 나타나는지 확인할 수 있어 판단이 점검 가능한 것으로 전환됩니다.
이 중 어느 것도 화학 배경이 필요하지 않습니다. 문서를 문서로 읽어야 합니다.
신원 확인, 일괄 처리
광저우 펩타이드 연구 센터는 로트 전체에 재사용되는 단일 과거 결과에 의존하기보다는 연구 펩타이드 배치에 대해 ESI-TOF 식별 확인을 실행합니다. 신원은 하위 실험실이 가장 먼저 신뢰해야 하는 것이므로 배치별로 신원을 확인하면 구매자가 실제로 받는 재료와 일치하는 기록을 유지할 수 있습니다.
구매자는 문서 패키지의 일부로 특정 배치와 연결된 신원 기록을 요청할 수 있습니다. 승인된 경우 독립적인 제3자 검증도 준비될 수 있습니다. 공급업체의 신원 확인과 외부 연구소의 확인은 동일한 질문에 대해 양쪽에서 답변을 제공하며 함께 사용하면 가장 유용합니다.
전체 검토에서 정체성이 차지하는 위치
신원 확인은 전체 그림이 아닌 진입점입니다. 완전한 연구 펩타이드 검토는 일반적으로 다음과 쌍을 이룹니다.
- 동일한 배치에 대한 HPLC 순도.
- 구매자의 작업이 의존하는 내용 또는 분석 수치입니다.
- 배치 번호, 제조 및 재시험 날짜, 보관 및 포장 세부 정보.
- SDS 및 사양서.
단일 혼합 "99%" 주장이 아닌 ID, 순도 및 콘텐츠를 별도의 일괄 연결 데이터 포인트로 유지하면 구매 팀이 가격뿐만 아니라 문서에 대한 견적을 비교할 수 있습니다.
이렇게 확인한 연구 펩타이드
ESI-TOF MS에 의한 신원 확인은 다음과 같은 프로젝트를 포함하여 광저우 펩타이드 연구 센터의 연구 펩타이드 원료 전반에 적용됩니다. 리타트루타이드, 세마글루타이드, BPC-157, MOTS-c, SS-31, KPV, 구리 삼중펩타이드-1(GHK-Cu), DSIP, Kisspeptin-10 및 Selank와 같은 더 짧은 연구 펩타이드. 모두 연구 및 실험실 사용을 위한 원료로만 제공됩니다. 배치 문서 패키지 또는 견적을 요청하려면 문서 및 RFQ 요청 양식, 또는 문서 센터.
자주 묻는 질문
질량 분석법은 펩타이드에 대해 무엇을 확인합니까?
이는 측정된 분자량이 의도한 서열의 이론적인 무게와 일치하는지 여부를 확인합니다. 이는 해당 물질이 올바른 분자임을 나타내지만 그 자체로는 순도나 바이알에 얼마나 많은 펩타이드가 들어 있는지 보고하지 않습니다.
MS 식별 결과는 순도와 동일합니까?
아니요. 동일성(질량 분석법)과 순도(일반적으로 HPLC)는 서로 다른 질문에 답하는 서로 다른 측정값입니다. 배치는 모두 검토되어야 하며 동일한 배치 번호에 연결되어 있어야 합니다.
하나의 펩타이드에 여러 개의 피크가 나타나는 이유는 무엇입니까?
전기분무 이온화에서 펩타이드는 종종 여러 전하를 운반하므로 한 번에 여러 질량 대 전하 값으로 나타납니다. 각 전하 상태는 동일한 분자량으로 다시 변환되며, 이를 통해 신원이 확인됩니다.
내 특정 배치에 대한 MS ID 기록을 얻을 수 있습니까?
그렇습니다. 신원 기록은 일괄 문서화 패키지의 일부로 제공될 수 있습니다. 승인된 경우 독립적인 제3자 검증도 준비될 수 있습니다.
작은 펩타이드가 분자량의 두 배에서 피크를 보이는 이유는 무엇입니까?
작은 펩타이드는 일반적으로 소스에서 이온 쌍을 형성하므로 스펙트럼은 단일 양성자화된 분자와 함께 양성자를 공유하는 두 분자 또는 나트륨 이온을 운반하는 쌍을 보여줄 수 있습니다. 이들은 불순물이 아닌 동일한 화합물의 이온 형태이며, 각각은 동일한 분자량으로 다시 변환됩니다.
분석 보고서가 내가 구매하는 배치와 연결되어 있는지 어떻게 알 수 있나요?
보고서 자체에 나타나는 배치 번호를 찾고, 명시된 취득 날짜가 차트에 인쇄된 원시 데이터 파일 이름과 일치하는지 확인하십시오. 배치 식별자가 없는 보고서는 그 수치가 무엇이든 납품된 자재와 일치할 수 없습니다.
공급업체 신원 확인이 제3자 테스트를 대체합니까?
그들은 서로를 보완합니다. 공급업체 측 신원 확인 및 독립적 검증은 두 방향에서 동일한 질문에 답합니다. 진지한 구매자는 일반적으로 두 가지 모두를 중요하게 생각합니다.
신원은 인증서에 대한 4가지 개별 확인 중 하나입니다. 순도, 함량, 충전량은 다른 것이며, 다른 것을 대체할 수는 없습니다. 는 주석이 달린 인증서 연습 실제 문서에서 분리하고 선적 전 서류 체크리스트 각각이 귀하의 손에 있어야 할 때를 다룹니다.